期刊简介

               本刊创刊于1975年,由江苏省卫生厅主管,江苏省人民医院主办的综合性医学学术期刊,系中国科技论文统计源期刊、综合性医药卫生类核心期刊、中国科技核心期刊、美国化学文摘(CA)收录期刊。以广大医药卫生技术人员为主要读者对象。办刊宗旨:贯彻执行党和国家的卫生工作方针政策,实行理论与实践、普及与提高相结合的方针;立足江苏,面向全国,报道以临床为主的医药卫生学术成果,为专业人员提供学术信息,促进国内外医学学术交流,起江苏省文献库的作用。                

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  • 杂志名称:江苏医药杂志
  • 主管单位:江苏省卫生厅
  • 主办单位:江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)
  • 国际刊号:0253-3685
  • 国内刊号:32-1221/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国科技论文统计源期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
江苏医药杂志2016年第02期

ApoM+ HDL和ApoM-HDL的分离纯化及其与SR-BI的结合

姚霜;罗光华;张晓膺;张俊;徐宁;郑璐

关键词:载脂蛋白M, 清道夫受体B类Ⅰ型
摘要:目的 分离纯化载脂蛋白M阳性和阴性高密度脂蛋白(ApoM+ HDL和ApoM HDL),检测其与清道夫受体B类Ⅰ型(SR-BI)的结合能力.方法 采用腹水诱生的方法以重组人ApoM免疫小鼠制备小鼠抗人ApoM单克隆抗体.利用该抗体通过亲和层析的方法分离ApoM+ HDL和ApoM HDL,采用二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量方法对其定量分析.通过免疫共沉淀方法检测ApoM+ HDL和ApoM-HDL与巨噬细胞株THP-1细胞表面表达的SR-BI的相互作用.结果 经免疫、融合、筛选,获得4株特异性分泌ApoM单抗的杂交瘤细胞株,采用腹水诱生方案进行ApoM抗体的大量表达,获得浓度为1 mg/ml的ApoM单抗,在1∶4000稀释后仍能在25 kD处检测出目的蛋白.利用ApoM单抗进行亲和层析,分别收集流出液(ApoM-HDL)、洗脱液(ApoM+ HDL),洗脱液中能检测到ApoM,流出液中未检测到ApoM.经BCA蛋白定量ApoM-HDL浓度为3.23 mg/ml,ApoM+ HDL浓度为0.34 mg/ml.佛波酯处理THP-1细胞后表面SR-BI表达升高10%左右.免疫共沉淀结果显示,ApoM-HDL、ApoM+ HDL孵育组的总蛋白经SR-BI抗体沉淀的复合物中均能检测到SR-BI和HDL,重组人ApoM孵育组也能检测到SR-BI和ApoM.结论 小鼠抗人ApoM单抗具有良好的灵敏度和特异度,ApoM-HDL和ApoM+ HDL两种蛋白成分和重组人ApoM均能与THP-1细胞表面SR-BI结合.