期刊简介
本刊创刊于1975年,由江苏省卫生厅主管,江苏省人民医院主办的综合性医学学术期刊,系中国科技论文统计源期刊、综合性医药卫生类核心期刊、中国科技核心期刊、美国化学文摘(CA)收录期刊。以广大医药卫生技术人员为主要读者对象。办刊宗旨:贯彻执行党和国家的卫生工作方针政策,实行理论与实践、普及与提高相结合的方针;立足江苏,面向全国,报道以临床为主的医药卫生学术成果,为专业人员提供学术信息,促进国内外医学学术交流,起江苏省文献库的作用。
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首页>江苏医药杂志

- 杂志名称:江苏医药杂志
- 主管单位:江苏省卫生厅
- 主办单位:江苏省人民医院(南京医科大学第一附属医院)
- 国际刊号:0253-3685
- 国内刊号:32-1221/R
- 出版周期:半月刊
期刊荣誉:中国科技论文统计源期刊期刊收录:上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
随机扩增多态性技术联合荧光定量PCR检测结核分枝杆菌方法的建立
严玉娟;邢益平;施旭东;严友德;艾月梅;刘雪
关键词:结核分枝杆菌, 随机扩增多态性技术, 荧光定量聚合酶链式反应
摘要:目的 结合随机扩增多态性技术(RAPD)和荧光定量聚合酶链式反应技术(qPCR)的优势,建立快速、准确地检测结核分枝杆菌的新方法.方法 根据国内外文献设计随机引物,以结核分枝杆菌标准菌株 H37Rv 为模板进行 RAPD,产物进行琼脂糖凝胶电泳,选取条带进行割胶纯化测序,在美国国家生物技术信息中心(NCBI)的基本局部比对搜索工具(BLAST)程序上进行同源性检索,结果和结核分枝杆菌匹配率都达到99%.设计特异性内引物和探针,以RAPD产物为模板进行qPCR,并优化反应条件.分别以10倍梯度稀释的一系列浓度的H37Rv和其他阴性对照菌为模板,进行qPCR和RAPD-qPCR,分析其灵敏性和特异性.结果 qPCR能够检测到30 pg/μl的结核分枝杆菌,而RAPD-qPCR灵敏性提高到3 fg/μl.而且RAPD-qPCR检测30 pg/μl至30 fg/μl的结核分枝杆菌核酸时,扩增得到的Ct值都较小[(6.58±0.19))~(14.95±0.36)],结果稳定,易于判断.qPCR和RAPD-qPCR检测其他临床常见的细菌均呈现阴性.结论 RAPD-qPCR是一种快速、准确地检测出结核分枝杆菌的新方法.
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