期刊简介
本刊创刊于1975年，由江苏省卫生厅主管，江苏省人民医院主办的综合性医学学术期刊，系中国科技论文统计源期刊、综合性医药卫生类核心期刊、中国科技核心期刊、美国化学文摘（CA）收录期刊。以广大医药卫生技术人员为主要读者对象。办刊宗旨：贯彻执行党和国家的卫生工作方针政策，实行理论与实践、普及与提高相结合的方针；立足江苏，面向全国，报道以临床为主的医药卫生学术成果，为专业人员提供学术信息，促进国内外医学学术交流，起江苏省文献库的作用。
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首页>江苏医药杂志
- 杂志名称：江苏医药杂志
- 主管单位：江苏省卫生厅
- 主办单位：江苏省人民医院（南京医科大学第一附属医院）
- 国际刊号：0253-3685
- 国内刊号：32-1221/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), CA 化学文摘(美), 维普收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日)
携带反义MDR1基因的逆转录病毒载体的构建和表达
王玮；傅建新；陈子兴；岑建农；李建勇；薛永权
关键词：MDR1基因, 反义RNA, 逆转录病毒, 基因转移, 基因表达
摘要：目的建立逆转录病毒介导的反义多药耐药MDR1基因转移体系,探讨反义RNA封闭白血病耐药细胞中MDR1基因表达的能力.方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法从白血病耐药细胞株HL-60/VCR mRNA中扩增出含有启始密码子ATG的524bp的MDR1基因cDNA片段,反向插入逆转录病毒载体pLXSN,通过脂质体转和乒乓感染单、双噬型包装细胞GP+E86和GP+envAM12,以双嗜型病毒上清感染白血病耐药细胞K562/MDR,半定量RT-PCR和流式细胞术(FCM)分析MDR1基因转录和P-糖蛋白(P-gp)的表达.结果酶切、PCR和DNA测序证实反义MDR1基因重组逆转录病毒载体pLASSN构建正确;双嗜型病毒生产细胞的滴度为1.3×105CFU/ml,巢式PCR和补救分析均未检测到辅助病毒存在;PCR和RT-PCR分析证实病毒生产细胞和反义修饰的耐药细胞K562MDR/LASSN中均有反义MDR1基因整合和MDR1基因反义RNA的转录;FCM分析K562MDR/LASSN细胞中P-gp表达强度和表达率比对照细胞均有明显下降.结论逆转录病毒介导的反义基因转移系统安全有效,可用于肿瘤耐药逆转的研究.
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